【期刊導讀】T細胞亞群可參與預測PEG IFNα治療HBeAg陽性初治慢乙肝患者的療效

編者按：聚乙二醇干擾素α（PEG IFNα）具有抗病毒和免疫調節的雙重功能。適應性免疫應答對HBV清除至關重要，反映了PEG IFNα治療慢性乙型肝炎（CHB）的免疫調節功效，已有多項研究探索了PEG IFNα治療過程中的免疫機制，但在治療期間T細胞表面部分重要共抑制分子的動態變化仍需進一步闡明。

程序性細胞死亡蛋白-1（PD-1）作為抑制性受體，在慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染患者的衰竭T細胞上表達最高；PD-L1是PD-1的配體之一，在HBV感染的肝細胞中表達增加。T細胞免疫球蛋白和粘蛋白結構域蛋白-3（TIM-3）在衰竭T細胞表面過表達，可通過促進CD8+ T細胞衰竭而負向調控T細胞應答。HBV感染患者CD4+ CD25+ T細胞的頻率顯著高于健康者，具有抑制其他T細胞活化的功能。

近期，來自蘇州市第五人民醫院的朱傳武教授團隊在International Journal of General Medicine發表成果，探討了T細胞亞群對PEG IFNα治療慢乙肝患者療效的預測價值，結果顯示：HBeAg陽性慢乙肝患者經PEG IFNα治療后CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high抑制性T細胞亞群比例顯著下降；CD4+ CD25high T細胞聯合基線ALT和HBV DNA可預測PEG IFNα的療效。

研究方法

納入2018年在蘇州市第五人民醫院住院的65例CHB患者，HBeAg陽性，血清HBV DNA > 5 log10 IU/mL，血清ALT升高2 - 10 ULN（ULN為40 IU/L）。在開始PEG IFNα治療前，所有患者均未接受免疫調節劑治療以及抗病毒治療。28例在本院體檢的健康者作為對照組。

所有患者均接受PEG IFNα治療52周，皮下注射，180 μg/QW。若PEG IFNα治療24周后HBV DNA水平較基線下降< 2 log10 IU/mL，則加用恩替卡韋0.5 mg/d。在PEG IFNα治療期間，每月檢測肝功能和血細胞計數，每3個月檢測HBV血清學標志物和HBV DNA。在基線和治療第52周檢測CD8+ PD-1+，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T細胞的比例。

在第52周，ALT < 40 IU/L或HBV DNA < 2.7 log10 IU/mL或HBeAg血清學轉換的患者定義為應答者，其余患者定義為無應答者。血清學應答（SR）定義為HBeAg血清學轉換。聯合應答（CR）定義為治療結束時（EOT，第52周）HBeAg血清學轉換、ALT < 40 IU/L和HBV DNA < 2.7 log10 IU/mL。

患者特征

治療第52周，89.2%（58例）患者ALT < 40 IU/L，66.2%（43例）患者HBV DNA < 2.7 log10 IU/mL（其中3例在第24周加用恩替卡韋治療），49.2%（32例）患者獲得HBeAg血清學轉換（SR）。獲得SR的患者中有52.3%（34例）獲得聯合應答（CR）。

CHB組與健康對照組的性別、年齡無統計學差異（P> 0.05）。在T細胞亞群變量中，CHB組與對照組的CD8+ PD-1+，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T細胞比例有統計學差異（P< 0.05），CHB組均顯著高于對照組（P< 0.05）。

表1：患者特征

研究結果

01 PEG IFNα治療可降低慢乙肝患者抑制性T細胞亞群比例

在PEG IFNα治療后，CD8+ PD-1+ T細胞比例略有下降，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T細胞的比例顯著降低。CHB組在PEG IFNα治療前CD8+ PD-1+、CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T細胞比例均顯著高于對照組，但治療結束時這三種T細胞亞群比例降為與對照組無顯著差異。

圖1：慢乙肝患者與對照組的抑制性T細胞亞群比較

02 ALT < 40 IU/L的慢乙肝患者在治療52周后部分抑制性T細胞亞群比例顯著降低

在ALT < 40 IU/L組，CD8+ PD-1+ T細胞的比例在治療期間無明顯變化，而CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T細胞的比例顯著降低。在ALT ≥ 40 IU/L組，三種T細胞亞群的比例在PEG IFNα治療前后無顯著差異。但ALT < 40 IU/L組治療后CD4+ CD25high T細胞比例顯著低于ALT ≥ 40 IU/L組。

圖2：PEG IFNα治療前后，不同ALT水平的慢乙肝患者的抑制性T細胞亞群比較

03 HBV DNA < 2.7 log10 IU/mL的慢乙肝患者在治療52周后抑制性T細胞亞群比例顯著降低

治療52周后HBV DNA < 2.7 log10 IU/mL組的CD8+ PD-1+，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T細胞比例顯著降低。HBV DNA ≥ 2.7 log10 IU/mL組的三種T細胞亞群比例在治療前后無顯著差異。治療結束時HBV DNA ≥ 2.7 log10 IU/mL組的CD8+ PD-1+和CD4+ CD25high T細胞比例顯著高于HBV DNA < 2.7 log10 IU/mL組。

圖3：PEG IFNα治療前后，不同HBV DNA水平的 慢乙肝患者抑制性T細胞亞群比較

04 第52周獲得HBeAg血清學轉換的慢乙肝患者抑制性T細胞亞群比例顯著降低

治療52周后，獲得HBeAg血清學轉換患者的CD8+ PD-1+，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T細胞比例顯著降低，且顯著低于未獲得HBeAg血清學轉換的患者。HBeAg血清學轉換患者基線CD4+ CD25high T細胞比例顯著高于未獲得HBeAg血清學轉換患者，治療52周后三種T細胞亞群的比例均顯著低于未獲得HBeAg血清學轉換患者。

圖4：PEG IFNα治療前后， 不同治療應答人群的抑制性T細胞亞群比較

05 基線ALT、HBV DNA和CD4+ CD25high T細胞構成的模型可預測HBeAg陽性初治慢乙肝患者PEG IFNα治療的療效

基線ALT水平與治療后CD8+ PD-1+和CD4+ CD25high T細胞呈負相關。基線HBV DNA水平與治療后CD8+ PD-1+，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high T細胞呈正相關。基線CD4+ CD25high T細胞比例與基線ALT水平呈正相關，與基線HBV DNA，治療后CD8+ PD-1+和CD8+ Tim-3+ T細胞呈負相關。

圖5：經PEG IFNα治療的慢乙肝患者 抑制性T細胞亞群與臨床特征的相關性分析

逐步logistic回歸分析表明基線CD4+ CD25high T細胞比例、基線ALT和HBV DNA是預測慢乙肝患者獲得SR的獨立因素。聯合三者構建療效預測模型，得出若0.028 * ALT + 0.178 * CD4+ CD25high T細胞-1.583 * HBV DNA ≥ -5.13，可預測患者獲得SR；若0.006 * ALT + 0.158 * CD4+ CD25high T細胞-1.848 * HBV DNA ≥ -10.256，可預測患者獲得CR。由CD4+ CD25high T細胞、基線ALT和HBV DNA構成的預測模型，可很好地預測HBeAg陽性初治慢乙肝患者PEG IFNα治療的療效。

圖6：預測PEG IFNα治療獲得血清學應答 和聯合應答的ROC曲線分析

肝霖君有話說

已有多種生物學標志物可用于預測PEG IFNα治療慢乙肝患者的療效（相關鏈接一，二，三，四）。本研究顯示PEG IFNα治療可降低HBeAg陽性慢乙肝患者CD8+ PD-1+，CD8+ Tim-3+和CD4+ CD25high抑制性T細胞的比例，由CD4+ CD25high T細胞、基線ALT和HBV DNA構成的最佳模型可用于預測PEG IFNα治療HBeAg陽性初治慢乙肝患者的療效。

此外，多項研究對PEG IFNα治療所涉及的免疫調控機制進行了探索（T細胞、B細胞、NK細胞、DC細胞等）（相關鏈接一，二，三，四），基于PEG IFNα的治療策略能臨床治愈慢乙肝也得益于其強大的免疫調節能力，因此免疫相關因素可能也可作為療效預測的良好指標，但臨床應用仍有更多的挑戰。

參考文獻：

Zhu L, Li J, Xu JC, et al. Significance of T-Cell Subsets for Clinical Response to Peginterferon Alfa-2a Therapy in HBeAg-Positive Chronic Hepatitis B Patients [J]. Int J Gen Med, 2022, 15: 4441-4451.