干擾素α治療顯著降低HBV DNA和pgRNA水平，能激活多種免疫細胞

編者按：第73屆美國肝病研究學(xué)會年會（AASLD 2022）于當(dāng)?shù)貢r間2022年11月4日 - 8日在美國召開。

為了實現(xiàn)HBV的臨床治愈，激活耗竭的免疫系統(tǒng)將是治療慢乙肝患者的可行治療策略。因此，再現(xiàn)慢乙肝免疫特性的動物模型也在不斷研究中。在AASLD 2022摘要中發(fā)表的一項日本研究建立了慢乙肝免疫活性小鼠模型，實驗表明：干擾素α（IFNα）治療可顯著降低慢乙肝小鼠血清HBV DNA水平和肝內(nèi)pgRNA水平；其抗病毒作用可能涉及激活包括NK細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞在內(nèi)的多種免疫細胞。

研究方法

將富馬酰乙酰乙酸水解酶（FAH）cDNA單獨或與HBV基因組共同克隆到SB轉(zhuǎn)座子載體上（SB-FAH和SB-HBV-FAH）。通過水動力尾靜脈注射（HTVi），將SB-HBV-FAH和SB轉(zhuǎn)位酶表達載體引入FAH敲除（KO）小鼠的肝細胞中，使其在不服用尼替西農(nóng)的情況下無法避免致死性肝損傷。

在停止HTVi和服用尼替西農(nóng)后，只有肝內(nèi)基因組整合的SB-HBV-FAH表達的HBV和FAH可以補償FAH的缺失，并促使肝細胞再生，導(dǎo)致HBV的持續(xù)表達（CHB小鼠）。在FAH KO小鼠中注射SB-FAH載體建立對照小鼠。對這些小鼠的病毒和免疫動力學(xué)進行評估。注射后8 - 9周，給CHB小鼠注射重組IFNα（10,000 單位/小鼠每日，腹腔注射）。

患者結(jié)果

在慢乙肝小鼠中，血清HBV DNA水平維持在3.5 log IU/ml左右，持續(xù)到32周，并且HBsAg和FAH在整個肝臟中表達。慢乙肝小鼠血清ALT水平、caspase-3/7活性和肝內(nèi)TUNEL陽性細胞數(shù)量均顯著高于對照組，提示慢乙肝小鼠肝臟存在慢性炎癥。

CHB小鼠肝臟中PD-1和Tim-3陽性的CD8+T細胞（CTL）升高，且CTL耗竭的速度與血清HBV DNA水平呈正相關(guān)。IFNα治療可顯著降低血清HBVDNA水平和肝內(nèi)pgRNA水平，并伴有輕度ALT升高。流式細胞術(shù)顯示，在IFNα處理的CHB小鼠的肝臟和脾臟中，NK細胞及其顆粒酶B產(chǎn)生的頻率升高。肝內(nèi)單核細胞的單細胞RNA測序顯示，在包括NK細胞、巨噬細胞和樹突狀細胞在內(nèi)的廣泛免疫細胞中，ISG15表達較高。

研究結(jié)論

建立了一個新的慢乙肝小鼠模型，具有持續(xù)性病毒血癥和慢性肝臟炎癥，可用于分析免疫應(yīng)答。IFNα的抗病毒作用可能涉及多種免疫細胞的激活。

肝霖君有話說

多項臨床研究顯示，基于聚乙二醇干擾素α的聯(lián)合治療方案能極大提高臨床治愈率，優(yōu)勢患者可達30% - 80%（相關(guān)鏈接）。為了進一步提高臨床治愈率，使更多患者獲益，近年來，關(guān)于慢乙肝患者接受基于IFNα治療的免疫機制研究越來越多，涉及多種免疫細胞和趨化因子，包括T細胞、B細胞、NK細胞和DC細胞等等（相關(guān)鏈接一、二、三、四、五）。該研究也驗證了IFNα的抗病毒作用可能涉及多種免疫細胞的激活。期望未來免疫機制的逐步清晰可以推進臨床治愈率的進一步提升。

參考文獻：

Shigeno S, Kodama T, Murai K, et al. Anti-viral and immune modulating effects of IFNa in a novel immunocompetent mouse model of chronic hepatitis B. AASLD2022, Abstracts (1115).

往期內(nèi)容請點擊

【AASLD2022速遞】中國慢乙肝臨床治愈（珠峰）工程項目階段性進展入選大會口頭報告

【期刊導(dǎo)讀】DC細胞也與提高慢乙肝患者臨床治愈率相關(guān)

【期刊導(dǎo)讀】聚乙二醇干擾素α治療慢乙肝有利于重塑B細胞亞群，且與HBsAg清除有關(guān)