APASL2021：ALG

降低乙肝表面抗原（HBsAg）是實現慢性乙型肝炎功能性治愈的關鍵一步。此前的研究結果表明，反義寡核苷酸(ASO)能有效降低動物模型和慢性乙型肝炎患者中的HBsAg。然而，肝毒性是反義寡核苷酸(ASO)的一個主要副作用，這種作用在更高活性、更高親和力的鎖核酸(LNA)修飾后作用會更加強烈。

研究人員發現，下一代橋聯核酸(BNA)和核酸堿基修飾的單體可以在改善或維持療效的同時降低肝毒性。因此，研究人員將這些化學物質應用在他們針對乙肝病毒、同時還含有鎖核酸(LNA)的反義寡核苷酸(ASO)類藥物上，在此基礎上開發出了ALG-020572作為治療慢性乙型肝炎的主要反義寡核苷酸(ASO)候選藥物。

研究人員采用標準亞磷酰胺化學法在ABI394和Expedite8909合成器上合成了含鎖核酸(LNA)和橋聯核酸(BNA)化學成分的反義寡核苷酸(ASO)。采用HBsAg釋放法在HepG2.2.15細胞中篩選鎖核酸-反義寡核苷酸（LNA-ASOs）。

其次研究人員便是選擇有效的含鎖核酸(LNA)的反義寡核苷酸(ASO)用N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)進行偶聯，并以每周3×10mg/kg的劑量在腺相關病毒(AAV)-HBV小鼠模型中進行測試。在AAV-HBV小鼠模型中，按照內部算法應用BNA翼和堿基間隙修飾，并與其全LNAASO進行比較。

研究結果顯示，AligosTherapeutics的反義寡核苷酸(ASO)平臺技術通過在翼上鏈接第三代橋聯核酸(BNA)，GAP中使用核苷酸修飾，成功地解決了LNAASO的肝毒性問題。

ALG-020572就是AligosTherapeutics研發出的一款翼中帶有橋聯核酸(BNA)、GAP使用核苷酸修飾的、靶向小乙肝表面抗原開放閱讀框區的HBVASO。針對ALG-020572的研究發現乙肝病毒基因型之間高度同源。轉染后的體外EC50值為15.4nM。

在人類ASGPR介導的攝取下，一種ALG-020572類似物在來自FRG小鼠的感染乙型肝炎病毒的原代人肝細胞（PHH）中采用HBsAg分泌試驗法測得的EC50值為27nM。在未轉染的乙肝病毒感染的仿真3-D肝芯片中，還表現出乙肝表面抗原的降低跟ALG-020572類似物的劑量相關。

在AAV-HBV小鼠模型中，ALG-020572重復給藥血清中乙型肝炎表面抗原呈現劑量依賴性降低。與賦形劑對照組相比，以6×10mg/kg劑量重復給藥時，HBsAg最大下降量約為1.5log10IU/mL。未觀察到ALT升高。

在HepG2.2.15細胞的HBsAg釋放試驗中，ALG-020579類似物與S抗原轉運抑制寡核苷酸聚合物(STOPSTM)化合物ALG-010133具有很強的協同作用。

ALG-020572與靶向于X開放閱讀框區域的HBVASO（ALG-020576）聯合使用時，在AAV-HBV小鼠模型中表現出疊加效果。

ALG-020572類似物與乙肝病毒核苷類似物恩替卡韋、或衣殼組裝調節劑類似物ALG-000184在急性病毒性肝炎-乙型肝炎小鼠模型中顯示出疊加作用。

綜上數據，研究認為，ALG-020572是一款經過第三代橋聯核酸(BNA)和核酸堿基修飾的HBV反義寡核苷酸(ASO)，臨床前條件已經獲得改善。該化合物可與其他抗乙肝藥物有效聯合應用。目前ALG-020572正在向臨床開發邁進。（更多肝病新藥研究信息敬請關注“肝臟時間”微信公眾號）！